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本试剂盒是以未经冻存的酿酒酵母平板菌落（无需摇菌）或者菌液作为菌体来源（短期4℃保存的平板或者菌液亦可使用），无需制备感受态细胞，无需分步热激，一步转化，整个操作流程在90min内完成。省去了通过两次培养获得状态良好的菌体的过程，以及制备感受态的过程，节省了1～2天的菌种培养转化时间，或者购买感受态的经费。其转化率可达经典酵酿酒母转化方法（KD0256）的50～80%（常规酵母杂交菌种检测）。转化效率可满足除文库传化之外的其它转化实验。

• 转化全程要求无菌操作。
  
• 为了保证转化效率，感受态不宜直接用液氮冻存。
  
• 增加酵母质粒的纯度和浓度可以提高转化效率。

• 菌落转化步骤：
  
  • 在无菌的1.5mL的离心管中加入100μL的P1溶液（转化液）。
    
  • 在上述转化液中加入1μg的质粒DNA。共转加入每种质粒各1μg。
    
  • 挑取2～3个较大酵母菌落加入上述转化液中，震荡混匀。
    
  • 置于42℃水浴60min（每隔20min颠倒混匀一次，避免酵母菌沉底）。
    
  • 可选步骤：3000rpm离心3min，弃上清。用400μL YPD Plus Liquid Medium（KD2207）重悬，30℃摇床震荡培养30～60min。YPD Plus用于转化后复苏酵母菌，转化效率可以提高50～100%。
    
  • 3000rpm离心3min，弃上清。加入100μL无菌水重悬菌体。
    
  • 将重悬菌体全部涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
    
  • 30℃恒温培养3～5天，直至平板长出菌落。
• 菌液转化步骤：
  收集1.5～3mL酵母菌液沉淀后，加入100μL P1溶液（转化液）和1μg质粒DNA后震荡混匀。后续步骤和平板菌落转化步骤4-8相同。